条带中间出现白斑点
1. 原因：底物消耗过快，中间区底物消耗完不发光了；
2. 优化：降低蛋白量，降低一抗和二抗的浓度；
3. 解析：快速操作，在中间部位底物消耗之前就把胶光片定影出来，一般实验员很难把控制；首0选从降低蛋白量，降低一抗二抗浓度入手。
出现黑点
1. 原因：膜上其他部位与一抗或者二抗非特---结合；
2. 优化：封闭用的牛奶一定要纯并且完全溶解，封闭后至少洗膜一次；
3. 解析：确定封闭牛奶完全溶解，否则封闭时会导致不溶性颗粒附着在膜上，在发光时膜上会出现黑点；建议在牛奶溶解之后静止三分钟，轻取上层牛奶液进行封闭，封闭结束常规洗膜一次；孵育一抗或二抗时，cryptococcus抗体，需要加牛奶的也请参照此操作。
ii型---钙粘蛋白cadherin-10（cdh10）的改变与胰0腺导管腺癌相关。
cdk4抗体orb38076 pubmed 27959383国际肿0瘤学杂志
二甲0双胍联合索拉0非尼通过靶向mtor途径抑制肝细胞癌的增殖并---自噬。
cdkn1b抗体orb305952 pubmed 27707884白细胞生物学杂志
ikaros 6通过激0活akt-foxo1途径保护---淋巴细胞白0血病细胞免受柔红霉0素---的凋亡。
非特---条带
1. 原因：一抗有非特---与蛋白结合；
2. 优化：更换一抗或参考“高背景”；
3. 解析：此种情况多数是因一抗不好，换一支抗体；设置好对照组区分目的条带；还有可能是一抗浓度过高引起的非特---结合。
条带有边缘规则的白圈
1. 原因：转膜时膜和胶之间存在气泡；
2. 优化：转膜前去掉膜和胶之间的气泡；
3. 解析：赶气泡太容易，省略。
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