非特---条带
1. 原因:一抗有非特---与蛋白结合;
2. 优化:更换一抗或参考“高背景”;
3. 解析:此种情况多数是因一抗不好,换一支抗体;设置好对照组区分目的条带;还有可能是一抗浓度过高引起的非特---结合。
条带有边缘规则的白圈
1. 原因:转膜时膜和胶之间存在气泡;
2. 优化:转膜前去掉膜和胶之间的气泡;
3. 解析:赶气泡太容易,省略。
其他问题
1. 条带连成一片。多数原因是上样量过多,其次是样品弥散或中途停止了电泳;
2. 条带偏高或者偏低。常有可能是蛋白有修饰现象;还有可能是胶的浓度与目的蛋白的浓度不对应,隐球菌鼠单抗,例如说100kd以上的蛋白用的12%胶跑,或者说20kd的蛋白用的6%胶跑;再是蛋白有降解,会在比原来位置低的地方出现主带,跟着出现一些其他条带,明显现象是所有的条带比正常的都低,且条带模糊不清晰。
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zo-1抗0体orb157pubmed 22272087国际分子科学杂志
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