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1. 原因:蛋白量太大,一抗浓度偏高和孵育时间太长;
2. 优化:根据实验需求调整上样蛋白量,调整一抗浓度和时间;
3. 解析:这种情况也是常见问题,上样蛋白量一般会做预实验避免;还有容易发生的是一抗浓度太高,作用时间太长引起的,品牌一抗都有稀释比例建议;再个---的一抗直接37度孵育半小时就好,cryptococcus neoformans,无需孵育过夜;再强调一遍洗膜千万不要偷懒,次数和时间洗---,不要---把抗体和蛋白洗掉没那么脆弱。
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